Transmission-blocking compound candidates against Plasmodium vivax using P. berghei as an initial screening

BACKGROUND Different strategies for improvement of malaria control and elimination are based on the blockage of malaria parasite transmission to the mosquito vector. These strategies include the drugs that target the plasmodial sexual stages in humans and the early developmental stages inside mosquitoes. OBJECTIVES Here we tested Malaria Box compounds in order to evaluate their activity against male and female gametocytes in Plasmodium berghei, mosquito infection in P. vivax and ookinete formation in both species. METHODS/FINDINGS The membrane feeding assay and the development of ookinetes by a 24 h ex vivo culture and the ookinete yield per 1000 erythrocytes were used to test transmission-blocking potential of the Malaria Box compounds in P. vivax. For P. berghei we used flow cytometry to evaluate male and female gametocyte time course and fluorescence microscopy to check the ookinete development. The two species used in this study showed similar results concerning the compounds' activity against gametocytes and ookinetes, which were different from those in P. falciparum. In addition, from the eight Malaria Box compounds tested in both species, compounds MMV665830, MMV665878 and MMV665941 were selected as a hit compounds due the high inhibition observed. CONCLUSION Our results showed that P. berghei is suitable as an initial screening system to test compounds against P. vivax.

Evaluación de la calidad del diagnóstico de malaria en la red local de laboratorios y en los laboratorios intermedios en el contexto de la eliminación de la enfermedad en Ecuador / Quality evaluation of malaria diagnosis in the local laboratories network and in intermediate laboratories in a setting towards the disease elimination in Ecuador

Resumen Introducción. El cumplimiento de la meta de eliminación de la malaria en Ecuador en el 2020 exige contar con la capacidad requerida para el diagnóstico microscópico ajustado a los estándares de calidad de la Organización Mundial de la Salud (OMS) y de la Organización Panamericana de la Salud (OPS) y proveer el tratamiento adecuado a los pacientes. Objetivo. Conocer la idoneidad o competencia de los microscopistas de la red pública local para el diagnóstico parasitológico de la malaria y el desempeño de los laboratorios intermedios de referencia. Materiales y métodos. Se hizo un estudio descriptivo de corte transversal a partir de la información obtenida en los talleres de evaluación de idoneidad en el diagnóstico microscópico de la red de laboratorios en las coordinaciones zonales de salud utilizando un panel de láminas para evaluar la concordancia del diagnóstico. Además, se calificó el desempeño de los laboratorios intermedios en el diagnóstico en el marco del programa de evaluación externa del desempeño. Los resultados se compararon con los obtenidos por el laboratorio supranacional de Perú. Resultados. En los 11 talleres realizados, se evaluó la idoneidad de 191 microscopistas, de los cuales 153 (80,1 %) aprobaron las pruebas. Las medianas de los indicadores fueron las siguientes: concordancia entre la detección y el resultado, 100 % (Q1- Q3: 96-100); concordancia en la especie, 100 % (Q1- Q3: 93-100); concordancia en el estadio, 93,0 % (Q1- Q3: 86-95) y concordancia en el recuento, 77 % (Q1- Q3: 71-82). En el programa de evaluación externa de desempeño, los tres laboratorios intermedios obtuvieron una concordancia del 100 % en el resultado y una del 96 % en la especie. Conclusiones. Los indicadores de competencia de la red local y de desempeño de los laboratorios intermedios alcanzaron altos estándares de calidad acordes con el proceso de entrenamiento implementado en el país.

Abstract Introduction: To reach the goal of malaria elimination in Ecuador for the year 2020, it is necessary to have a laboratory network with the capacity to perform microscopic diagnosis according to the WHO/PAHO quality standards and to provide the adequate treatment of cases. Objective: To determine the level of competence for parasitological diagnosis of the microscopists from the local public network and the performance of intermediate reference laboratories. Materials and methods: We conducted a cross-sectional study based on the information collected in workshops carried out to appraise the competence for microscopic diagnosis of the local laboratory network (zonal health coordinating offices 1 to 8) using a slide panel to evaluate diagnosis agreement, as well as the diagnostic performance of the intermediate laboratories using an external quality assessment program. The results were compared against the reference standards of the supranational laboratory in Perú. Results: We evaluated the competencies of 191 microscopists in 11 workshops and 153 (80.1%) of them were approved. The medians of the indicators were the following: concordance for parasite detection, 100% (Q1- Q3: 96-100), concordance for species identification, 100% (Q1- Q3: 93-100), and concordances for stage identification, 93.0% (Q1- Q3: 86-95) and parasite counting, 77.0% (Q1- Q3: 71-82). In the external quality assessment, the three intermediate laboratories obtained 100% in parasite detection concordance and 96% for species detection concordance. Conclusions: The results for the primary network and the performance indicators for the intermediate laboratories showed the high-quality standards of the training program implemented in the country.

Therapeutic efficacy of alternative primaquine regimens to standard treatment in preventing relapses by Plasmodium vivax: A systematic review and meta-analysis / Eficacia terapéutica de esquemas de Primaquina usados como alternativa al tratamiento estándar en la prevención de recaídas por Plasmodium vivax: Una revisión sistemática y meta-análisis

Objective: To compare efficacy and safety of primaquine regimens currently used to prevent relapses by P. vivax. Methods: A systematic review was carried out to identify clinical trials evaluating efficacy and safety to prevent malaria recurrences by P. vivax of primaquine regimen 0.5 mg/kg/day for 7 or 14 days compared to standard regimen of 0.25 mg/kg/day for 14 days. Efficacy of primaquine according to cumulative incidence of recurrences after 28 days was determined. The overall relative risk with fixed-effects meta-analysis was estimated. Results: For the regimen 0.5 mg/kg/day/7 days were identified 7 studies, which showed an incidence of recurrence between 0% and 20% with follow-up 60-210 days; only 4 studies comparing with the standard regimen 0.25 mg/kg/day/14 days and no difference in recurrences between both regimens (RR= 0.977, 95% CI= 0.670 to 1.423) were found. 3 clinical trials using regimen 0.5 mg/kg/day/14 days with an incidence of recurrences between 1.8% and 18.0% during 330-365 days were identified; only one study comparing with the standard regimen (RR= 0.846, 95% CI= 0.484 to 1.477). High risk of bias and differences in handling of included studies were found. Conclusion: Available evidence is insufficient to determine whether currently PQ regimens used as alternative rather than standard treatment have better efficacy and safety in preventing relapse of P. vivax. Clinical trials are required to guide changes in treatment regimen of malaria vivax.

Objetivo: Comparar la eficacia y seguridad de los esquemas de primaquina actualmente usados para prevenir las recaídas de malaria por P. vivax. Métodos: A través de una revisión sistemática se identificaron ensayos clínicos que evaluaran la eficacia y seguridad para prevenir recurrencias por P. vivax del régimen de primaquina 0.5 mg/Kg/día por 7 o 14 días comparado al régimen estándar de 0.25 mg/Kg/día por 14 días. Se determinó la eficacia de primaquina con la incidencia acumulada de recurrencias posterior a 28 días. Se estimó el riesgo relativo global con un meta-análisis de efectos fijos. Resultados: Se identificaron 7 ensayos clínicos para el régimen 0.5 mg/Kg/día/7 días que mostraron una incidencia de recurrencias entre 0% y 20% con un seguimiento de 60 a 210 días; solo 4 estudios compararon con el régimen estándar y no se encontraron diferencias en las recurrencias entre ambos esquemas (RR= 0.977; IC 95%= 0.670-1.423). Se identificaron tres ensayos clínicos que usaron el esquema 0.5 mg/Kg/día/14 días con una incidencia de recurrencias entre 1.8% y 18.0% para 330 a 365 días; solo un estudio comparó con el régimen estándar (RR= 0.846; IC 95%= 0.484-1.477). Se encontró alto riesgo de sesgo y diferencias en la conducción de los estudios incluidos. Conclusión: No hay suficiente evidencia para determinar si los regímenes de primaquina usados como alternativas al tratamiento estándar tienen mejor eficacia para prevenir las recaídas de P. vivax. Se requieren ensayos clínicos para orientar los cambios en el esquema de tratamiento de este tipo de malaria.

Immunoregulation in human malaria: the challenge of understanding asymptomatic infection

Asymptomatic Plasmodium infection carriers represent a major threat to malaria control worldwide as they are silent natural reservoirs and do not seek medical care. There are no standard criteria for asymptomaticPlasmodium infection; therefore, its diagnosis relies on the presence of the parasite during a specific period of symptomless infection. The antiparasitic immune response can result in reducedPlasmodium sp. load with control of disease manifestations, which leads to asymptomatic infection. Both the innate and adaptive immune responses seem to play major roles in asymptomatic Plasmodiuminfection; T regulatory cell activity (through the production of interleukin-10 and transforming growth factor-β) and B-cells (with a broad antibody response) both play prominent roles. Furthermore, molecules involved in the haem detoxification pathway (such as haptoglobin and haeme oxygenase-1) and iron metabolism (ferritin and activated c-Jun N-terminal kinase) have emerged in recent years as potential biomarkers and thus are helping to unravel the immune response underlying asymptomatic Plasmodium infection. The acquisition of large data sets and the use of robust statistical tools, including network analysis, associated with well-designed malaria studies will likely help elucidate the immune mechanisms responsible for asymptomatic infection.

The Duffy binding protein as a key target for a Plasmodium vivax vaccine: lessons from the Brazilian Amazon

Plasmodium vivax infects human erythrocytes through a major pathway that requires interaction between an apical parasite protein, the Duffy binding protein (PvDBP) and its receptor on reticulocytes, the Duffy antigen/receptor for chemokines (DARC). The importance of the interaction between PvDBP (region II, DBPII) and DARC to P. vivax infection has motivated our malaria research group at Oswaldo Cruz Foundation (state of Minas Gerais, Brazil) to conduct a number of immunoepidemiological studies to characterise the naturally acquired immunity to PvDBP in populations living in the Amazon rainforest. In this review, we provide an update on the immunology and molecular epidemiology of PvDBP in the Brazilian Amazon - an area of markedly unstable malaria transmission - and compare it with data from other parts of Latin America, as well as Asia and Oceania.

Caracterização molecular de Plasmodium vivax isolados de infecções primárias e recaídas e a influência da homeostase do ferro na ativação dos hipnozoítos

As hipóteses deste trabalho são a de que parasitos que causam recaídas são geneticamente homólogos aos parasitos das infecções primárias e que infecções múltiplas podem estar presentes nas infecções primárias e recaídas; Além dessas, outra hipótese é de que a hepcidina esteja envolvida no desenvolvimento de recaídas. Neste contexto, o objetivo do trabalho foi analisar a variabilidade genética de isolados de amostras pareadas infecção primária/recaídas de um mesmo paciente e investigar a associação entre a homeostase do ferro, particularmente da hepcidina e sua associação com a ativação dos hipnozoítos além de avaliar a resposta imunológica contra os principais antígenos do P. vivax. Sessenta e cinco amostras pareadas de 30 pacientes foram genotipadas utilizando 10 marcadores moleculares através de eletroforese capilar. Além disso, a presença de infecção múltipla nos pacientes foi confirmada através da clonagem dos fragmentos amplificados dos microssatélites e genotipagem a partir de diferentes colônias. Na análise baseada nos alelos predominantes foi demonstrado que os parasitos da recaída são principalmente heterólogos em relação à infecção primária e que geralmente ocorre uma flutuação entre os alelos predominantes nos diferentes episódios do indivíduo. Entretanto, o número de alelos por marcador foi limitado e geralmente os alelos foram idênticos nos diferentes episódios da doença num mesmo paciente.

A principal contribuição deste estudo foi demonstrar uma alta taxa de infecções múltiplas tanto das infecções primárias como nas recaídas, sendo que infecções múltiplas puderam ser identificadas com um mínimo de Cinco marcadores.Foram feitas dosagens bioquímicas de ferro, ferritina, níveis de hepcidina e análise de outras variáveis como hemoglobina e parasitemia dos pacientes. Houve diferença significativa entre os grupos somente na análise de níveis de hemoglobina sendo maior nas recaídas. Acredita-se que o número de amostras foi um limitante das análises estatísticas. O gene codificador da hepcidina foi sequenciado nas amostras de área sem transmissão e de área endêmica. Não foram encontrado polimorfismos nesse gene mostrando seu alto grau de conservação. Não foi observada diferença nos níveis de resposta imunológica contra os antígenos do P. vivax nas infecções primárias e recaídas. As infecções por este parasito são observadas com alta diversidade genética e com a presença de múltiplas variantes em uma mesma infecção, sendo esta, primária ou recaída da doença, variantes que podem sofrer variações em sua frequência durante a evolução da doença. Com estes resultados espera-se contribuir para o esclarecimento dos aspectos relacionados à diversidade genética dos parasitos e dos mecanismos que influenciam o desenvolvimento das recaídas do P. vivax, que poderão ajudar no seu prognóstico, direcionamento o tratamento e auxiliando no controle da doença.

Caracterização molecular de Plasmodium vivax isolados de infecções primárias e recaídas e a influência da homeostase do ferro na ativação dos hipnozoítos / Molecular characterization of isolates of Plasmodium vivax primary infection and relapse and influence of iron homeostasis in the activation of hypnozoites

As hipóteses deste trabalho são a de que parasitos que causam recaídas são geneticamente homólogos aos parasitos das infecções primárias e que infecções múltiplas podem estar presentes nas infecções primárias e recaídas; Além dessas, outra hipótese é de que a hepcidina esteja envolvida no desenvolvimento de recaídas. Neste contexto, o objetivo do trabalho foi analisar a variabilidade genética de isolados de amostras pareadas infecção primária/recaídas de um mesmo paciente e investigar a associação entre a homeostase do ferro, particularmente da hepcidina e sua associação com a ativação dos hipnozoítos além de avaliar a resposta imunológica contra os principais antígenos do P. vivax. Sessenta e cinco amostras pareadas de 30 pacientes foram genotipadas utilizando 10 marcadores moleculares através de eletroforese capilar. Além disso, a presença de infecção múltipla nos pacientes foi confirmada através da clonagem dos fragmentos amplificados dos microssatélites e genotipagem a partir de diferentes colônias. Na análise baseada nos alelos predominantes foi demonstrado que os parasitos da recaída são principalmente heterólogos em relação à infecção primária e que geralmente ocorre uma flutuação entre os alelos predominantes nos diferentes episódios do indivíduo. Entretanto, o número de alelos por marcador foi limitado e geralmente os alelos foram idênticos nos diferentes episódios da doença num mesmo paciente...

A principal contribuição deste estudo foi demonstrar uma alta taxa de infecções múltiplas tanto das infecções primárias como nas recaídas, sendo que infecções múltiplas puderam ser identificadas com um mínimo de Cinco marcadores.Foram feitas dosagens bioquímicas de ferro, ferritina, níveis de hepcidina e análise de outras variáveis como hemoglobina e parasitemia dos pacientes. Houve diferença significativa entre os grupos somente na análise de níveis de hemoglobina sendo maior nas recaídas. Acredita-se que o número de amostras foi um limitante das análises estatísticas. O gene codificador da hepcidina foi sequenciado nas amostras de área sem transmissão e de área endêmica. Não foram encontrado polimorfismos nesse gene mostrando seu alto grau de conservação. Não foi observada diferença nos níveis de resposta imunológica contra os antígenos do P. vivax nas infecções primárias e recaídas. As infecções por este parasito são observadas com alta diversidade genética e com a presença de múltiplas variantes em uma mesma infecção, sendo esta, primária ou recaída da doença, variantes que podem sofrer variações em sua frequência durante a evolução da doença. Com estes resultados espera-se contribuir para o esclarecimento dos aspectos relacionados à diversidade genética dos parasitos e dos mecanismos que influenciam o desenvolvimento das recaídas do P. vivax, que poderão ajudar no seu prognóstico, direcionamento o tratamento e auxiliando no controle da doença...

Análise espacial e determinação de áreas prioritárias para o controle da malária, no Estado no Tocantins, 2003-2008 / Spatial analysis and determination of priority areas for malaria control in the State of Tocantins, from 2003 to 2008

INTRODUÇÃO: No Tocantins, a malária apresenta comportamento diferenciado entre as microrregiões, com predominância dos casos importados. Este estudo descreve a análise espacial da malária no estado, no período de 2003 a 2008, buscando identificar nas microrregiões a incidência de casos autóctones e importados, bem como a procedência destes últimos. MÉTODOS: Trata-se de um estudo retrospectivo, pautado em dados secundários, que teve como fonte de dados o Sistema de Informações de Vigilância Epidemiológica - Malária (SIVEP-Malária), analisados através dos softwares estatísticos Epi Info versão 3.5.1. e Bioestat versão 5.0. RESULTADOS: Constatou-se que a malária não teve distribuição homogênea em todos os municípios. A área de maior prioridade agregou municípios localizados nas microrregiões oeste do estado, fronteira com o Pará, onde também se concentram o maior número de casos autóctones. A associação entre os casos autóctones e importados e as espécies de Plasmodium mostrou uma diferença estatisticamente significativa (G = 54,25; p < 0,0001). Das oito microrregiões, Miracema do Tocantins, Araguaína e Bico do Papagaio agruparam 75,8 por cento dos casos, e nessas, onze municípios se sobressaíram. Quanto à procedência, o Estado do Pará apresentou ampla distribuição com 85,5 por cento do total, seguido por Guiana Francesa com 7,4 por cento. CONCLUSÕES: Os resultados demonstraram a predominância dos casos importados e a diferença entre os municípios e microrregiões, apontando pela influencia de estados vizinhos na determinação das áreas de maior risco. Esses dados são importantes, pois contribuem para orientação e direcionamento das políticas públicas para o agravo no Tocantins.

INTRODUCTION: In Tocantins, the behavior of malaria differs between microregions, with predominance of imported cases. This study describes a spatial analysis on malaria in the state covering 2003 to 2008, which sought to identify the incidence of autochthonous and imported cases, and the origin of the latter, in the microregions. METHODS: This was a retrospective study using secondary data. The data source was the epidemiological surveillance information system for malaria (SIVEP-Malária), and the data were analyzed using the Epi Info version 3.5.1 and Bioestat version 5.0 statistical software. RESULTS: It was found that malaria was not homogeneously distributed in all municipalities. The area of highest priority comprised municipalities located in microregions in the west of the state, at the border of Pará, which also had the highest number of autochthonous cases. The association between the autochthonous and imported cases and the Plasmodium species showed a statistically significant difference (G = 54.25; p < 0.0001). Among the eight microregions, Miracema do Tocantins, Araguaína and Bico do Papagaio accounted for 75.8 percent of the cases and, among these, eleven municipalities stood out. Regarding provenance, the State of Pará showed widespread distribution with 85.5 percent of the total, followed by French Guiana with 7.4 percent. CONCLUSIONS: These results demonstrated the predominance of imported cases and the difference between municipalities and microregions, and showed the influence of neighboring states in determining the areas of greatest risk. These data are important, since they contribute towards guiding and directing public policies regarding this disease in Tocantins.

Infecciones maláricas en individuos asintomáticos en la población indígena Jivi, Amazonas, Venezuela / Asymptomatic malaria infection in the indigenous Jivi population, Amazonas state, Venezuela

Se evaluó la presencia de infecciones maláricas en individuos asintomáticos en la población Jivi de Puente Parhueña. El estudio fue de tipo prospectivo en tres momentos. El diagnóstico parasitológico se realizó mediante el examen convencional de gota gruesa y extendido (GGE) y la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). El diagnóstico por microscopia indicó 2% (5/261) de láminas positivas en Abril, 1% (3/274) en Septiembre y 4% (5/135) en Diciembre. La PCR para Plasmodium spp., fue 46% (26/57) en abril, 49% (28/57) en Septiembre y 35% (20/57) en Diciembre. En los tres momentos predominó la presencia de P. vivax. La prueba de ELISA demostró 72% (41/57) seroreactivos en Abril, 53% (30/57) en Septiembre y 60% (34/57) en Diciembre. En Puente Parhueña habitan individuos con infecciones maláricas asintomáticos, con persistencia de anticuerpos antimalaricos, que probablemente representan un reservorio de gametocitos dentro de la comunidad.

The study was carried out to determine the present malaria infection in the asymptomatic Jivi people of Puente Parhueña. The study was prospective over three periods of time. The parasitological diagnoses were from thick and thin blood smears (GGE) and polymerase chain reaction (PCR). The antibody search was performed by ELISA. Microscopy of the slides detected the following positive results: 2% (2/261) April, 1% (3/274) September and 4% (5/135) December. Detection of Plasmodium by PCR was 46% (26/57) in April, 49% (28/57) in September y 35% (20/57) in December. Plasmodium vivax infected individuals predominated during these 3 times. Positives for ELISA were 72% (41/57) in April, 53% (30/57) September and 60% (34/57) December. The study demonstrated that people living in Puente Parhueña presented asymptomatic malaria infection with malaria antibodies persistence which likely represents a gametocyte potential reservoir for infection among the population.

The monitoring of hematopoietic stem cell transplant donors and recipients from endemic areas for malaria / Monitoramento de doadores e receptores provenientes de áreas endêmicas para malária em transplante de células-tronco hematopoiéticas

Malaria is an unusual complication after hematopoietic stem cell transplantation in non-endemic countries. However, transplant candidates, recipients and donors living in endemic regions frequently report previous episodes of malaria. This fact could represent an important risk for immunosuppressed recipients that could develop severe malaria cases. We report a case of hematopoietic stem cell transplant (HSCT) in which the donor had a history of previous malaria, and close monitoring was performed before and after procedure by parasitological and molecular tests. The donor presented Plasmodium vivax in thick blood smears one month after transplant and was treated according to Brazilian Health Ministry guidelines. The polymerase chain reaction (PCR) was able to detect malaria infection in the donor one week earlier than thick blood film. Even without positive results, the recipient was pre-emptively treated with chloroquine in order to prevent the disease. We highlight the importance of monitoring recipients and donors in transplant procedures with the aim of reducing the risk of malaria transmission.

A malária é complicação incomum após o transplante de células-tronco hematopoiéticas em países endêmicos. No entanto, candidatos a transplantes, receptores e doadores que vivem em regiões endêmicas frequentemente relatam episódios anteriores de malária. Este fato pode representar um risco importante para receptores imunossuprimidos, que podem desenvolver casos de malária grave. Relatamos um caso de transplante de células-tronco hematopoiéticas (TCTH) em que o doador teve história de malária anterior e um monitoramento por meio de exames parasitológicos e moleculares foi realizado antes e após o procedimento. O doador apresentou Plasmodium vivax na gota espessa um mês após o transplante e foi tratado de acordo com as orientações do Ministério da Saúde brasileiro. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi capaz de detectar a infecção por malária no doador uma semana mais cedo do que a gota espessa. Mesmo sem resultados positivos, o receptor foi preventivamente tratado com cloroquina, a fim de prevenir as formas sanguíneas assexuadas. Destacamos a importância do monitoramento de receptores e doadores em procedimentos de transplante, com o objetivo de reduzir o risco de transmissão da malária.

Malaria vivax en niños: recurrencia con dosis total estándar de primaquina administrada durante 3 frente a 7 días / Vivax malaria in children: recurrences with standard total dose of primaquine administered in 3 vs. 7 days

Introducción: se ha evaluado poco en el mundo la eficacia del tratamiento con cloroquinaprimaquina para el ataque agudo y, sobre todo, para las recurrencias del paludismo vivax en niños; esos estudios en América Latina son muy escasos y casi inexistentes en Colombia.Objetivo: evaluar la eficacia de dos dosificaciones de primaquina en menores de 18 años.Materiales y métodos: estudio clínico controlado, no enmascarado, con asignación aleatoria del tratamiento. Se evaluaron dos grupos según la dosis de primaquina: 0,50 mg/kg/día por 7 días (0,50-7) frente a 1,17 mg/kg/día por 3 días (1,17-3).Resultados: A. Curación del ataque agudo: eficacia del 100% en los dos grupos; B. Prevención de las recurrencias durante 120 días: ocurrieron recurrencias en 68,4% de los niños tratados con el esquema 1,17-3, y en 34,2% de los que recibieron el régimen 0,50-7.Conclusiones: 1. La proporción de recurrencias a los 120 días en niños tratados con el esquema 0,50-7 (34,2%) fue significativamente menor que la de los niños que recibieron el régimen 1,17-3 (68,4%). 2. El tiempo de administración de una misma dosis total de primaquina influye en su eficacia contra las recurrencias: a menos días, menor eficacia.

Introduction: Worldwide, the efficacy of cloroquine-primaquine for treating acute Plasmodiumvivax malarious attacks has not been thoroughly evaluated. In Latin America such studies arescarce, and in Colombia, almost nonexisting. Objective: To assess the efficacy of two regimens foradministration of primaquine in children aged less than18 years. Methodology: A clinical, controlled, unmasked studywas carried out, with randomized administration of twoprimaquine regimens, namely: 0.50 mg/kg/day for 7days (0.50-7) vs. 1.17 mg/kg/day for 3 days (1.17-3). Results: A. Healing of the acute attack: efficacy was100% in both groups. B. Prevention of recurrencesduring 120 days: recurrences occurred in 68.4% ofchildren treated with the 1.17-3 regimen, and in 34.2%of those receiving the 0.5-7 one. Conclusions: 1. Proportion of recurrences during the120 days follow-up was significantly lower (34.2%) inchildren receiving the 0.50-7 regimen than in thosetreated with the 1.17-3 one (68.4%). The length ofadministration of the same total dose of primaquineinfluenced its efficacy against recurrences: shorterperiods of administration were associated with lesserefficacy.

Malaria control in the municipality of San Esteban, Honduras / Control de la malaria en el municipio de San Esteban, Honduras

OBJECTIVES: To assess the burden of malaria in San Esteban, Department of Olancho, Honduras, and provide recommendations for control. METHODS: Malaria causes appreciable morbidity in San Esteban. In 2006, health workers reported an increase in malaria cases and requested recommendations for control. In 2005, 385 cases (Plasmodium vivax, 316; P. falciparum, 69) were detected from 4 007 blood smears in the San Esteban laboratory (slide positivity rate = 9.6 percent). During May-July 2006, we assessed the burden of malaria and made recommendations. We reviewed epidemiologic data from slide-confirmed malaria cases in 2005 and 2006 and conducted a knowledge, attitudes, and practices survey in households to assess malaria diagnostic, treatment, and prevention practices. RESULTS: During May-July 2006, 143 laboratory-confirmed malaria cases were detected (P. vivax, 134; P. falciparum, 9) in San Esteban, compared with 104 (P. vivax, 79; P. falciparum, 25) in May-July 2005. From January 2005 to July 2006, 538 cases were detected in San Esteban, with increased frequency in May-October and the highest incidence in children 0-14 years old. We administered 112 surveys in 19 communities. Seventy percent of respondents reported a history of malaria in a household member, with the highest frequency reported in mothers (45 percent) and children under 14 years old (37 percent). Most households did not have mosquito protection such as bed nets, screens, or indoor residual insecticide. CONCLUSIONS: Malaria is ongoing in San Esteban, with increased incidence in children. We recommend increased availability and promotion of insecticide-treated bed nets, improved timing and coverage of indoor residual spraying, and improved community malaria practices through education sessions.

OBJETIVOS: Evaluar la carga de malaria en San Esteban, departamento de Olancho, Honduras, y ofrecer recomendaciones para su control. MÉTODOS: La malaria es causa de una considerable morbilidad en San Esteban. En 2006, los trabajadores sanitarios informaron un aumento de casos de malaria y solicitaron recomendaciones para su control. En 2005, en el laboratorio de San Esteban se detectaron 385 casos (316 por Plasmodium vivax y 69 por P. falciparum) en 4 007 frotis sanguíneos (tasa de positividad: 9,6 por ciento). Entre mayo y julio de 2006 se evaluó la carga de malaria y se hicieron las recomendaciones. Se revisaron los datos epidemiológicos de los casos confirmados de 2005 y 2006 y se aplicó una encuesta sobre conocimientos, actitudes y hábitos en los hogares para evaluar las prácticas relacionadas con el diagnóstico, el tratamiento y la prevención de la malaria. RESULTADOS: Entre mayo y julio de 2006 en San Esteban se detectaron 143 casos de malaria confirmados por el laboratorio (134 por P. vivax y 9 por P. falciparum), en comparación con 104 (79 por P. vivax y 25 por P. falciparum) entre mayo y julio de 2005. Entre enero de 2005 y julio de 2006 se detectaron 538 casos en San Esteban, con un aumento en la frecuencia entre mayo y octubre y la mayor incidencia en niños de 0 a 14 años. Se aplicaron 112 encuestas en 19 comunidades. De los que respondieron, 70 por ciento había tenido algún miembro del hogar con malaria, con una mayor frecuencia en las madres (45 por ciento) y los menores de 14 años (37 por ciento). La mayoría de los hogares carecían de protección contra los mosquitos, como mosquiteros para las camas y ventanas o fumigación de interiores. CONCLUSIONES: La malaria se mantiene en aumento en San Esteban, con una mayor incidencia en los niños. Se recomienda incrementar la disponibilidad y la promoción de mosquiteros tratados con insecticidas, mejorar la periodicidad y la cobertura de la fumigación de interiores y mejorar los hábitos...

Eficacia de tres esquemas con cloroquina – primaquina para el tratamiento de la malaria por Plasmodium vivax en Colombia / Efficacy of three chloroquine-primaquine regimens for treatment of Plasmodium vivax malaria in Colombia

La malaria por Plasmodiun vivax es una de las principales causas de morbilidad en centro y sur América. En Colombia es la más prevalente y representa el 75 por ciento de los casos reportados. La primaquina (PQ) es la única droga disponible de uso clínico para eliminar los hipnozoitos y prevenir recaídas en la malaria por P. vivax. Se hizo un ensayo clínico aleatorio controlado sin placebo y no ciego. Se estudió la eficacia antirrecaída de tres esquemas de tratamiento con dosis total de PQ (45, 105 y 210 mg) suministrados en dosis de 15 mg/día, en 210 adultos con diagnóstico de P. vivax en dos municipios de Antioquia (Colombia). Todos los pacientes recibieron una dosis total de 1.500 mg de cloroquina [CQ] en tres días (600 mg el día 1 y 450 mg los días 2 y 3). Los pacientes tuvieron una respuesta clínica adecuada del 100 por ciento al tratamiento CQ+PQ hasta el día 28, en los tres grupos. El porcentaje de recurrencias durante los seis meses de seguimiento fue de 45 por ciento, 36,6 por ciento y 17,6 por ciento para los grupos con 45, 105 y 210 mg de PQ respectivamente. El tratamiento convencional (210 mg) fue un factor de protección para las recurrencias cuando se comparó con los esquemas de 45 y 105 mg respectivamente. El tratamiento convencional sigue siendo el tratamiento más eficaz para prevenir las recaídas en la malaria por P. vivax en una zona endémica...

Plasmodium vivax malaria is an important cause of morbility in Central and South America. In Colombia this is the most prevalent malaria infection representing75 % of the reported cases. To define the efficacy of the chloroquine and primaquine regimen to eliminatehypnozoites and prevent relapses, we a conducted a random controlled clinical trial of three primaquine regimens in an open-label study. We evaluated the anti-relapse efficacy of a total primaquine dose of 45, 105 and 210 mg administered at 15mg/day in 210 adults with P. vivaxinfection from the Northwestern region of Colombia. Cure rates for blood stage vivax malaria by day 28 of followupwere 100 % in all groups. Post-treatment reappearance of parasitaemia during the 6 months of following up was 45 %, 36,6 % and 17,6 % respectively, for each group. When compared to other groups, administration of 210 mg was a significant protection factor for reappearance of parasitaemia in an endemic area.

Adjuvant requirement for successful immunization with recombinant derivatives of Plasmodium vivax merozoite surface protein-1 delivered via the intranasal route

Recently, we generated two bacterial recombinant proteins expressing 89 amino acids of the C-terminal domain of the Plasmodium vivax merozoite surface protein-1 and the hexa-histidine tag (His6MSP1(19)). One of these recombinant proteins contained also the amino acid sequence of the universal pan allelic T-cell epitope (His6MSP1(19)-PADRE). In the present study, we evaluated the immunogenic properties of these antigens when administered via the intra-nasal route in the presence of distinct adjuvant formulations. We found that C57BL/6 mice immunized with either recombinant proteins in the presence of the adjuvants cholera toxin (CT) or the Escherichia coli heat labile toxin (LT) developed high and long lasting titers of specific serum antibodies. The induced immune responses reached maximum levels after three immunizing doses with a prevailing IgG1 subclass response. In contrast, mice immunized by intranasal route with His6MSP1(19)-PADRE in the presence of the synthetic oligonucleotides adjuvant CpG ODN 1826 developed lower antibody titers but when combined to CT, CpG addition resulted in enhanced IgG responses characterized by lower IgG1 levels. Considering the limitations of antigens formulations that can be used in humans, mucosal adjuvants can be a reliable alternative for the development of new strategies of immunization using recombinant proteins of P. vivax.

The genetic diversity of Plasmodium vivax: a review

The genetic diversity of Plasmodium vivax has been investigated in several malaria-endemic areas, including the Brazilian Amazon region, where this is currently the most prevalent species causing malaria in humans. This review summarizes current views on the use of molecular markers to examine P. vivax populations, with a focus on studies performed in Brazilian research laboratories. We emphasize the importance of phylogenetic studies on this parasite and discuss the perspectives created by our increasing understanding of genetic diversity and population structure of this parasite for the development of new control strategies, including vaccines, and more effective drugs for the treatment of P. vivax malaria.

Plasmodium vivax thrombospondin related adhesion protein: immunogenicity and protective efficacy in rodents and Aotus monkeys

The thrombospondin related adhesion protein (TRAP) is a malaria pre-erythrocytic antigen currently pursued as malaria vaccine candidate to Plasmodium falciparum. In this study, a long synthetic peptide (LSP) representing a P. vivax TRAP fragment involved in hepatocyte invasion was formulated in both Freund and Montanide ISA 720 adjutants and administered by IM and subcutaneous routes to BALB/c mice and Aotus monkeys. We measured specific humoral immune responses in both animal species and performed a sporozoite challenge in Aotus monkeys to assess the protective efficacy of the vaccine. After immunization both mice and Aotus seroconverted as shown by ELISA, and the specific anti-peptide antibodies cross reacted with the parasite in IFAT assays. Only two out of six immunized animals became infected after P. vivax sporozoite challenge as compared with four out of six animals from the control group. These results suggest that this TRAP fragment has protective potential against P. vivax malaria and deserves further studies as vaccine candidate.

Aspectos da transmissão focal de malária na Ilha de São Luis, Maranhão / Aspects of the focal transmission of malaria in the Island of São Luis, Maranhão

O estudo foi desenvolvido com o objetivo de caracterizar um foco de transmissão de malária em Guarapiranga, município de São José de Ribamar, MA. A unidade de estudo foi o grupo familiar, aplicando-se questionário sobre identificação, situação econômica, hábitos dos moradores e características dos domicílios. Foram visitadas 54 famílias, totalizando 207 habitantes, sendo 113 do sexo masculino e 95, do feminino. 95 pessoas tinham de 5 a 24 anos. Agricultura e pesca são a base da economia local, com 64,8 por cento das famílias auferindo renda mensal menor que um salário mínimo. A maioria das casas é construída de taipa, coberta de palha, tem piso de chão batido e não tem instalações sanitárias. Em relação à entrada de mosquitos, 62,2 por cento são parcialmente protegidas. A água para consumo provém de cacimbas ou poços rasos em 78,8 por cento, e o lixo é deixado a céu aberto em 53,7 por cento dos domicílios. Foram registrados 106 casos de malária por Plasmodium vivax. O provável transmissor foi o Anopheles (N) aquasalis e o tratamento com cloroquina associado à primaquina teve bons resultados.

Chloroquine concentration profile in the community of Mewat region, district Gurgaon (Haryana), India.

A survey was conducted to find chloroquine concentration profile in the community of Mewat region district Gurgaon (Haryana) of India. 88 P. falciparum and 3 P. vivax cases were detected out of 148 blood slides examined with a SPR of 61.48. Plasma chloroquine and desethylchloroquine concentrations were determined in 55 P. falciparum and 2 P. vivax patients and 29 persons whose blood slides were negative for malaria parasite before giving any treatment. Mean chloroquine concentrations in cases with P. falciparum parasites and without malaria parasites were 0.018 and 0.016 microg ml(-1) respectively. Chloroquine to desethyl chloroquine ratio was between 2 and 3 in both groups. Only 10 malaria parasite negative cases out of 29 had plasma chloroquine concentrations above 0.016 microg ml(-1) required for malaria chemoprophylaxis. Chloroquine was undetectable in plasma samples of 8 out of 55 P. falciparum cases. Chloroquine plasma concentrations in 21 P. falciparum cases were below therapeutically effective concentration of 0.016 microg ml(-1) suggesting improper treatment while in 29 P. falciparum cases, parasitemia recurred despite required chloroquine concentration confirming chloroquine resistant status. Irregular prophylaxis and lack of proper treatment was one of the major causes of malaria outbreak in this area.

Quimioprofilaxia da malária com mefloquina na amazônia brasileira / Mefloquine chemoprophylaxis of malaria in the Brazilian Amazonia

Em estudo randômico duplo-cego, 122 voluntários morando em área endêmica de malária na Regiäo Amazônica de Rondônia) foram divididos em quatro grupos para estudo da supressäo malárica. O grupo I recebeu 500 mg de mefloquina a cada quatro semanas; o grupo II 250 mg de mefloquina a cada duas semanas; o grupo III um comprimido de Fansidar (500 mg de sulfadoxina + 25 mg de pirimetamina) por semana e o grupo IV, recebeu apenas placebo. Um ataque agudo de malária ocorreu em um indivíduo do grupo I, em dois indivíduos do grupo II e em seis indivíduos dos grupos III e IV. A proteçäo verificada nos grupos em uso de mefloquina foi significantemente superior comparada ao grupo placebo. A mefloquina, em ambas as dosagens usadas, mostrou-se efetiva na supressäo malárica em uma área onde o Plasmodium falciparum plurirresistente é altamente prevalente